SA3800 全光谱流式细胞分析仪
* 革命性的全光谱流式技术
* 快速,稳定,高效的新一代3D高通量上样器
* 灵活多样的4激光器配置(488nm/405nm/561nm/638nm)
* 高解析度,高度可靠,可重复的检测分析系统
* 友好直观的操作界面,全自动设置实现无人值守的样本检测
产品特性
先进的光谱分析技术
采用索尼革命性的全光谱分析技术,荧光的光谱信息通过高灵敏度的32通道光电倍增管收集,可以反复录入和调取光谱库中的标准荧光素光谱和实验的配色信息,令每次实验的荧光解析简捷方便,分析结果不以人为因素而改变,保证检测过程准确、可靠且高效地进行。
光谱分析技术是SA3800系统的核心,光谱流式通过获取500nm-800nm全波长范围内的荧光信号,帮助使用者获得更真实,可靠的数据;在传统流式系统中,检测通道的荧光信号受到滤光片的波长限制,所获得的荧光信号很少;而且往往需要通过单标对照来计算单标荧光溢漏到其他检测通道百分比扣除重叠的荧光信号(荧光补偿),使得人为带来了分析结果的误差。相反,光谱流式获取所有的荧光数据,应用光谱解析方法,拆分荧光信号;检测过程中不仅获取丰富而全面的荧光信号,而且无需人为扣减数据(荧光补偿),可对自发荧光进行拆分和分析,保留检测数据的真实性,可靠性,准确性。
SA3800全光谱流式系统采用棱镜模组与32通道PMT检测器,对每一个细胞同时采集34个荧光数据点,同时收集从420nm至800nm波长范围内荧光信号,帮助使用者可以获得准确的荧光信号,获得真实,可靠,准确的分析结果。
光谱技术另一项强大的数据计算能力—光谱解析,可以帮助研究人员将所有的混合荧光信号拆分成单独的荧光素信号,从而在没有遗漏信号和没有人为扣减数据下,计算得到更加准确的荧光定量信息。
光谱拆分可将每个光谱指纹分离,从而实现荧光染料的完整和最佳呈现。
光谱解析能够拆分每个荧光素指纹图谱,帮助使用者呈现更丰富的荧光信息,实现更加丰富,真实,可靠的荧光定量计算结果。传统流式采用滤光片方式限制了荧光波长从而限制了检测器收集的信号。然而对于荧光素发射出的荧光,滤光片总会遗漏一部分滤光片波长范围外的荧光信息。全光谱流式检测技术收集从420nm - 800nm的荧光信息。全光谱设计提高了弱荧光信号的检出的同时也帮助研究人员更准确的鉴别稀有细胞群体。
这项技术使得研究人员能够将自发荧光光谱从被荧光素掩饰下的混合光谱中抽离出来,并作为独立的荧光参数进行荧光定量分析。由于没有丢失荧光信息,没有人为扣减数据(荧光补偿),能够从荧光素中抽离自发荧光信号;从而在全光谱流式技术中能够获得更真实,更可靠,更准确的数据分析结果。
光谱分析可减少假阳性,提供比传统流式细胞仪更准确的分析。以小鼠的脾脏细胞双染 CD4 APC 和抗 IL-2 PE 为例。A. 在该传统密度图中,无法确定浅蓝色区域是弱 PE、弱双阳性还是非特异性结合。B.使用光谱分析,将每个区域的光谱数据与光谱库的内容进行比较,以对样本进行光谱拆解。结果表明浅蓝色区域是强自发荧光。Sony SP6800 收集的代表性数据
数据检测的标准化、规范化
用户通过一键选择标准化模式(StandardizationMode),使得全球索尼流式光谱分析仪实现检测性能标准化和规范化,科学家们在任意两台SA3800仪器之间及同一台仪器的不同时间点均能获得一致结果。
全新自动上样器(3D AutoSampler )
3D AutoSampler,可在前后、左右、上下三个维度移动,便于高速且稳定的细胞上样,同时支持流式管、96孔板和384孔板。高通量、快速、可靠和低残留的自动上样,同时配有完备的混匀和低温模块。
系统自动化
整个工作流程都实现了自动化,可简化操作并确保产生准确结果。该系统试管进样器支持各种标准孔板和深孔板,以及 5 mL 试管(12 x 75 mm)。
创新的 3D AutoSampler
创新的 3D AutoSampler使用固定式进样针并在水平和垂直方向上移动检测板,可最大限度地减少样本间的交叉污染并加快清洗速度。
进样针上的传感器使系统能够准确地将样本移动到探针,计算试管或检测板的高度,并在进样针接触试管或板底表面时自动回缩进样针。这种独特的设计旨在减少交叉污染和堵塞,并在遇到液流故障时实现自动恢复。它还可以在两次取样之间加快清洗速度。
检测板移动机制使用固定式进样针并在水平和垂直方向上移动检测板(和样本)
自动取样混合和制冷载台
3D AutoSampler混匀功能可确保在 96 孔或 384 孔样本检测板的采集过程中实现一致的采样。
软件可优化每种检测板类型的设置。重要的是,混匀功能可保持样本的完整性和均一性,确保所有颗粒均适当悬浮,从而获得一致的结果。
3D AutoSampler 底座表面处的制冷载台可进一步降低变异性并抑制样本随时间推移而降解。
该图说明了如何使用系统的 3D 混匀功能保持细胞异质性。在未混匀时,较大的细胞沉降形成异质样本,如下方示意图所示。图形化数据说明了如何在从 1-96 孔中采集 3 μm 和 10 μm 微球的过程中保持样本的完整性,以提供更完整、一致的结果。
该图说明了在 80 分钟的检测板采集期间,制冷载台对样本温度的影响。
友好、直观的软件界面
用户操作界面直观易懂,方便高效地设置可满足不同实验需求的自动检测条件,适用于大样本量检测的用户。
软件
SA3800 软件非常容易学习和使用,它可以指导使用者从开机启动,标准化设置,光谱库建立,到配色方
案设计,上机获取数据,数据分析以及关机清洗。使用者和管理员可以通过偏好设置让整个仪器操作和实验设置便于使用,实现无人值守的样本检测。SA3800多项独特功能消除了仪器之间数据获取的差异性,提高了数据检测精度,保证每次实验结果的准确性、可靠性和可重复性。
系统启动
系统开启后在QC界面,用户可以通过校准微球让系统自动完成检测激光与液流是否垂直正交(Align Check),也可以自动检测仪器状态,包括检测器灵敏度(MESF),Q值和B值等,能够帮助用户在使用仪器前全面的了解仪器当前状态和性能。在软件界面上每一步操作都有人机对话框,指导用户一步一步完成仪器质控,最后形成可溯源的质检报告,为仪器质量审查提供历史依据。如果质检参数不达标,系统会自动提示。在软件中可以点击Optical Alignment 和 Flow Rate Calibration实现对仪器光路和液流的全自动校准,达到仪器最佳性
能状态;无需工程师对仪器上门调试就能完成仪器全自动校准,将仪器待机响应时间降至最短,
光谱库
光谱库功能可以使用户建立个人试剂光谱库,光谱库中的所有光谱可在今后实验中作为参考光谱被反复调用,免去了实验需要使用单标计算荧光补偿矩阵的烦恼。软件中有人机对话框指导使用者一步一步完成光谱库的建立。 一旦完成参考光谱数据获取,系统为参考光谱自动计算光谱指数(spectral index),用来作为以后调用参考光谱
的参考值。光谱库中的参考光谱在软件中实现一键调用,如果存在不能被同时调用的参考光谱,系统会自动提示;这项功能不仅提高了配色方案的准确性而且简化了实验流程,使流式实验变得轻松,便捷。
实验创建
可以在 Create Experiment(创建实验)窗口中使用模板、现有实验、单染色或多色分析来创建实验。用户可以指向并点选(或编辑)现有实验,还可在创建新实验时轻松选择孔或板的模板。设置分析向导可指导用户创建单染色或多色分析,从而简化实验创建。
采集与分析
所有仪器设置都在上机获取功能界面 Acquisition上实现,包括调整上样速度0-10,上样停止条件Stop Condition,调节电压,阈值,添加散点图,直方图,密度图,圈门,编辑统计表等。图型和统计表实时显示正在获取的数据。在Analysis界面可以自定义圈门统计表参数,导出FCS3.0, FCS3.1格式文件,以及粘贴各类图片,表格等。
无人值守式监测
在连续上样过程中,Event Checker功能可以监控液流状态,当检测到气泡或者由于堵塞导致细胞流速过低时,用户可以设置自动清除堵塞后停止上样;或者可以设置自动清除堵塞后保持连续上样。同时图中会实时显示哪些管或者孔遇到了气泡或者堵塞的状况。该功能帮助用户在无人值守的情况下对上样过程保持实时监控和记录;同时系统在遇到气泡或堵塞时能够自动排除气泡和堵塞,保持系统自动,快速,高效的运转。
自发荧光探测器
在常规流式细胞仪中,由吡啶 (NAD/NADH)、黄素 (FMN, FAD) 和其他细胞内氧化反应产生的细胞自发荧光可在 FITC、PE 和 Pacific Blue™ 等通道中引起荧光信号污染。借助采用光谱技术的自发荧光探测器,可以轻松找到并减去自发荧光光谱指纹,从而使研究人员能够看到真正的荧光细胞群。
光谱叠加
可以通过使用光谱叠加功能来创建比较光谱曲线,帮助在相同或不同实验中识别各个管/孔之间的独特细胞群。
关机
关机时,SA3800 软件会引导用户进行关机前清洗并自动关闭仪器。还可以使用软件向导来指导用户进行漂白剂清洗和去离子水冲洗程序。